聚丙烯酰胺凝胶出峰顺序(在制备聚丙烯酰胺凝胶时)
网上有很多关于聚丙烯酰胺凝胶出峰顺序的知识,也有很多人为大家解答关于在制备聚丙烯酰胺凝胶时的问题,今天小编为大家整理了关于这方面的
网上有很多关于聚丙烯酰胺凝胶出峰顺序的知识,也有很多人为大家解答关于在制备聚丙烯酰胺凝胶时的问题,今天小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
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一、聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳中为什么样品中加少许溴酚蓝和一定浓度甘油?
二、做聚丙烯酰胺凝胶电泳时,制备的分离胶不凝固,是什么原因?
四、在做聚丙烯酰胺凝胶电泳时为什么分离胶可以凝固,但浓缩胶很长时间都凝固不了
一、聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳中为什么样品中加少许溴酚蓝和一定浓度甘油?
溴酚蓝用来表示电泳的终点,因为它跑在蛋白质前面,一般溴酚蓝跑到终点就停止电泳。
高甘油比使样品下沉,取样孔底部铺一条线,避免样品飘散,带状锐利美观。
二、做聚丙烯酰胺凝胶电泳时,制备的分离胶不凝固,是什么原因?
混凝剂的加入量,以及APS是否来自储存时间过长,凝胶浓度为360,环境温度较低时不易凝胶。
三、聚丙烯酰胺凝胶出峰顺序
1、首先将聚丙烯酰胺溶于适量水中,配制成浓度约为0.1m g/ml的凝胶溶液。2、其次,电泳槽的准备和预试验,去离子水冲洗后,在不锈钢板上涂一薄层丙酮或乙醚(没有这两种物质,就不用涂了),然后均匀滴加一定量的胶体溶液(约10 ml/g)。3、最终电泳的合适时间为30~40分钟。
四、在做聚丙烯酰胺凝胶电泳时为什么分离胶可以凝固,但浓缩胶很长时间都凝固不了
主要问题可能是TEMED和AP的量。你可以参考我的公式:
分离凝胶12.5%(SDS),10毫升系统
分离缓冲液:2.5毫升
口香糖储存量:4.167毫升
纯水:3.233毫升
10% AP: 100微升
Temed: 5微升
浓缩胶5%,4毫升系统
浓度缓冲液:1毫升
胶水储存量:0.6毫升
纯净水:2.35毫升
10% AP: 45微升
Temed: 15微升
上面的配方被我个人用了无数次证明是有效的,一个小时左右就能固化。如果它在一天中凝结缓慢,可以将其放在25度的烤箱中,以帮助加速凝固。
以上就是关于聚丙烯酰胺凝胶出峰顺序的知识,后面我们会继续为大家整理关于在制备聚丙烯酰胺凝胶时的知识,希望能够帮助到大家!
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