高效液相色谱法,是做什么用的? 液相色谱是干什么的
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一、高效液相色谱法,是做什么用的?
高效液相色谱,简称HPLC,简单来说来自:用于样品的分离和检测。目前看来是最通用最有效的,我们经常在实验中使用。而且很简单,360问答。
二、请问HPLC是做什么的?原理?操作方法?
HPLC是高效液相色谱,英文全称是高效液相色谱。该方法在化学、医学、工业、农业、商品检验和法律检验中作为一种重要的分离分析技术。
用途:高效液相色谱更适用于沸点高、热稳定性差、生理活性大、分子量相对较大的物质的分离分析,因此广泛用于核酸、多肽、内酯、多环芳烃、聚合物、药物、人体代谢产物、表面活性剂、抗氧化剂、农药、除草剂等物质的分析。
原理:HPLC以液体为流动相,采用高压灌注系统将不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂和缓冲溶液等流动相泵入装有固定相的色谱柱中。柱内组分分离后,进入检测器进行检测,从而实现样品的分析分离。
操作方法:如下图所示,溶剂池中的流动相由泵吸入,由梯度控制器按一定梯度混合,然后输出。测量其压力和流量后,引入进样阀(装置),经过保护柱和分离柱,再由检测器检测。数据由数据处理设备处理或由记录仪记录色谱图,馏分由馏分收集器收集,废液由废液瓶收集。
扩展资料:在液相色谱的初始阶段,流动相是在室温、常压、有液面差的情况下,用大口径玻璃管柱输送的,称为经典液相色谱。这种方法柱效低,时间长(通常几个小时)。高效液相色谱是20世纪60年代末在经典液相色谱的基础上引入气相色谱理论而迅速发展起来的。
高效液相色谱根据固定相和流动相的组成可分为正相色谱和反相色谱。
正相色谱
采用极性固定相(如聚乙二醇、氨基和腈键合相);流动相为相对非极性的疏水溶剂(正己烷、环己烷等烷烃),常加入乙醇、异丙醇、四氢呋喃、氯仿来调节组分的保留时间。常用于分离中等极性和强极性的化合物(如酚类、胺类、羰基和氨基酸)。
反相色谱法
非极性固定相(如C18、 c8);)一般使用;流动相为水或缓冲液,常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等水溶性有机溶剂调节保留时间。它适用于分离非极性和弱极性化合物。RPC是现代液相色谱中应用最广泛的方法。据统计,它占整个HPLC应用的80%左右。
参考:百度百科-HPLC
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