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石蜡切片不封片能保存多久? 石蜡切片法

2023-03-06 22:20:45科技帅气的蚂蚁
网上有很多关于石蜡切片不封片能保存多久?的问题,也有很多人解答有关石蜡切片法的知识,今天艾巴小编为大家整理了关于这方面的知识,让我

网上有很多关于石蜡切片不封片能保存多久?的问题,也有很多人解答有关石蜡切片法的知识,今天艾巴小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!

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一、石蜡切片不封片能保存多久?

二、石蜡切片的制作方法?

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一、石蜡切片不封片能保存多久?

不会持续一天的。石蜡切片是组织学常规制作技术中应用最广泛的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞的形态结构,也是病理学和法医学中研究、观察和判断细胞形态变化的主要方法,在其他许多学科中也得到了广泛的应用。在教学中,光镜下观察的标本大多采用石蜡切片法制备。

活细胞或组织大多无色透明,细胞内各种组织和各种结构之间缺乏对比,一般光学显微镜下难以分辨清楚;离开身体后,组织会很快死亡和腐烂,失去原有的正常结构。所以组织要固定,石蜡包埋,切片染色,避免细胞死亡,其形态结构才能清晰辨认。

二、石蜡切片的制作方法?

肠道石蜡切片的制备(1)材料选择:用尖刀将罗非鱼的前肠切短一段(以距胃约5cm的前肠为准),组织块大小为3 ~ 5 mm 3 ~ 5 mm 10 ~ 15 mm.(2)固定:采用Bouin氏固定液进行瓶固定,固定液用量一般为组织块体积的10-20倍。(3)洗涤:固定12-24h后,将材料从固定液中取出,在70%的酒精中洗涤数次,在酒精中加入几滴氨水,直至呈黄色。(4)脱水:70%乙醇(1h)80%乙醇(1h)90%乙醇(1h)95%乙醇(1h)无水乙醇I (1h) 无水乙醇II (1h) (5)透明:无水乙醇和二甲苯溶液(1: 1) (1h)。二甲苯和石蜡(1:1)的混合液(1h)石蜡(1h)石蜡(1h)一定要浸泡透,否则组织中残留的透明剂会使切片过程困难,影响切片质量。(7)包埋:将融化的石蜡注入小纸盒中,将浸过石蜡的组织块放入其中,使蜡块迅速冷却变硬,组织块可长期保存在蜡块中。(8)切片:包埋组织块修整后,用切片机切成5~7m的石蜡带。(9)粘贴:将组织石蜡带铺在50摄氏度的温水中,然后用1%的HCl溶液捞出载玻片,使组织石蜡带粘贴在载玻片上。(10)烘烤:将贴好胶的载玻片放入35左右的恒温箱中晾干,2-3小时后取下编号。(11)苏木精-伊红染色:对干燥切片进行染色。脱蜡:将干燥切片放入二甲苯(I)中10分钟二甲苯(II)中10分钟。复水后预冲洗:将脱蜡后的切片移入100%酒精中5min95%%酒精中5min85%%酒精中5min70%%酒精中5min蒸馏水中5min。3He染色显示肠黏膜内淋巴细胞:将蒸馏水洗净的切片移入哈里斯苏木精中10分钟,使细胞核染色;用自来水冲洗切片上残留染料溶液;用1%盐酸酒精进行3秒钟的颜色分离;用自来水浸泡3小时,显微镜下观察,直至细胞核呈蓝色;然后将切片在曙红溶液中染色5分钟,使细胞质染色。用95%酒精和100%酒精脱水,二甲苯变得透明,然后用中性胶密封。奥新兰-沙黄染色显示肠内肥大细胞:切片常规脱蜡至蒸馏水奥新兰-沙黄染色15-20min 蒸馏水快速冲洗,镜检95%和100%乙醇分色脱水1-2min 二甲苯透明中性胶封闭。阿利新兰醋酸染色显示肠内杯状细胞:脱蜡后切片蒸馏水染色阿利新兰醋酸10min蒸馏水洗涤 1%高碘酸水溶液氧化5min蒸馏水微洗希夫试剂染色(37培养箱)30min普通水洗3次蒸馏水2min埃利希苏木精染色5 min 95%酒精和100%酒精脱水二甲苯透明。脱蜡后,切片用水冲洗:二甲苯(30分钟)、甲苯(10分钟)、无水乙醇(5分钟)、无水乙醇(5分钟)、95%乙醇(5分钟)、85%乙醇(5分钟)、70%乙醇(5分钟)、自来水(20分钟)。人Ehrlich苏木精染色12分钟,并用蒸馏水快速洗涤。盐酸酒精分色,显微镜检查控制时间。用曙红染色2分钟,用蒸馏水清洗。盐酸酒精分色,显微镜检查控制时间。用95%酒精和无水酒精脱水,透明二甲苯,中性胶密封。阿利斯泰尔-藏红复合染色液的方法称为Scaba法,阿利斯泰尔-藏红单独染色的方法基本上称为Spicer法。

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