电泳技术的广泛应用？ 琼脂糖凝胶电泳的作用和意义

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一、电泳技术的广泛应用？

一、电泳技术的广泛应用？

电泳技术是指带电粒子在电场作用下，由于电荷不同和分子大小差异而相互分离的一种实验技术。

很多生物分子都是带电荷的，电荷取决于分子结构和介质的pH值和成分。

由于混合物中各组分的电荷性质、电荷量和相对分子质量不同，在同一电场作用下，各组分的游动方向和速度也不同。

因此，在一定的时间内，各个部件的移动距离也是不同的，从而达到分离和识别各个部件的目的。

电泳技术主要用于分离各种有机物质(如氨基酸、肽、蛋白质、脂类、核苷酸、核酸等。)和无机盐；它也可以用来分析物质的纯度和确定分子量。

电泳结合其他分离技术(如色谱法)可用于分析蛋白质的结构，“指纹图谱”是电泳和色谱法的结合。

用免疫原理检测电泳结果，提高了区分蛋白质的能力。

电泳与酶学技术相结合发现了同工酶，深入了解了酶的催化和调节功能。因此，电泳技术是医学科学中一项重要的研究技术。

纸电泳和醋酸纤维素薄膜电泳长期以来被用于分离血清蛋白，并且它们被广泛用于实验室和临床测试。自1957年Kohn首次使用醋酸纤维素膜作为电泳支持物以来，纸电泳已被醋酸纤维素膜电泳所取代。

因为后者比纸电泳具有电渗更小、分离速度更快、分离更清晰、血清用量更少、操作更简单等优点。

琼脂糖凝胶电泳琼脂经处理去除果胶成分，即为琼脂糖。

由于琼脂糖中硫酸根含量少于琼脂，电渗作用减弱，因此分离效果显著提高。

例如，血清脂蛋白经琼脂糖凝胶电泳只能分离成两条带(-脂蛋白和-脂蛋白)，而血清脂蛋白经琼脂糖凝胶电泳可分离成三条带(-脂蛋白、前-脂蛋白和-脂蛋白)。

因此琼脂糖是凝胶电泳的理想材料。

血清中的脂质与载脂蛋白结合形成水溶性脂蛋白。各种脂蛋白中所含载脂蛋白的种类和数量不同，脂蛋白颗粒的大小不同，使其在电场中的运动速度不同，因此可以通过电泳分离。

聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶是一种合成凝胶，具有机械强度好、弹性高、透明、化学稳定性高、无电渗、设备简单、样品量小(1-100 ug)、分辨率高等优点。通过控制单体浓度或单体与交联剂的比例，可聚合成不同孔径的凝胶，可用于蛋白质、核酸等不同分子大小物质的分离、定性和定量分析。

解离剂十二烷基硫酸钠(SDS)也可以结合起来测定蛋白质亚基的相对分子量。电泳是带电的涂层离子在阳极和阴极施加的电压作用下向阴极移动，与阴极表面产生的碱性反应形成不溶物，沉积在工件表面的原理。

它包括四个过程：1)电解(分解)。首先，阴极反应是电解反应，产生氢和氢氧根离子OH。该反应导致在阴极表面形成高碱性边界层。当阳离子与羟基反应形成不溶于水的物质时，薄膜沉积下来。方程式为：H2OOH H2)电泳(迁移)阳离子树脂和H在电场作用下向阴极移动，阴离子向阳极移动。

3)在被镀工件表面进行电沉积(沉淀)。阳离子树脂以碱性方式与阴极表面反应，中和后无沉积物析出，沉积在被涂工件上。

4)工件表面的电渗(脱水)涂层固体和涂膜呈半透明状，孔隙较多。水从阴极涂膜中排出，使涂膜在电场作用下脱水，涂膜吸附在工件表面，从而完成整个电泳过程。电泳表面处理工艺的特点：电泳漆膜具有涂层丰满、均匀、平整、光滑的优点，其硬度、附着力、耐腐蚀性、耐冲击性、渗透性明显优于其他涂装工艺。

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