dpph法的优点? dpph自由基清除实验步骤
网上有很多关于dpph法的优点?的问题,也有很多人解答有关dpph自由基清除实验步骤的知识,今天艾巴小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
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一、dpph法的优点?
DPPH是亲脂性的,因此缺乏生物学相关性。PTIO自由基清除法被认为是一种理想的替代方法。
该方法可在水溶液和pH7.4的缓冲溶液中进行
二、每个溶液的清除dpph与浓度呈现线性吗
1、 DPPH自由基清除能力的测定称取一定量的DPPH,用无水乙醇配制成0.04mg/mL的DPPH溶液。取2mL不同浓度(2,4,6,8mg/ml)的溶液,加入2mL DPPH溶液,混匀,室温放置30min,以5000r/min离心10min。取上清液,在517nm处测量吸光度。Vc作为阳性对照。样品的DPPH自由基清除率按下式计算2、总还原能力的测定:在10mL离心管中加入2.5ml pH 6.6的0.2 mol/L磷酸缓冲液和1mL不同浓度(2,4,6,8 mg/ml)的溶液,加入2.5ml 1%铁氰化钾,混匀后在50反应20min。取出后,加入2.5毫升10%三氯乙酸终止反应,以5000转/分钟离心10分钟。取2.5毫升上清液,加入2.5毫升蒸馏水和0.5毫升三氯化铁,混匀,静置10分钟,于700纳米处检测吸光度。Vc作为阳性对照。
三、硒是怎样清除自由基的
自由基是一种极其活跃、不稳定、寿命很短的化合物,原子核外层有不成对电子。因为不稳定,自由基会和体内的细胞、组织发生化学反应,带走电子。这个化学反应过程叫做氧化。
当自由基产生过多或清除过慢时,会通过攻击活体大分子和各种细胞,在分子水平、细胞水平和组织器官水平造成各种损伤,加速机体衰老进程,诱发各种疾病。已经证明,人类的大多数疾病,尤其是人类衰老的过程,都与自由基的攻击密切相关。硒半胱氨酸为酶的活性中心提供了一个必要的因素。GSH-PX利用谷胱甘肽将有毒的过氧化物还原为无害的羟基化合物,分解过氧化物,清除自由基,保护细胞膜的结构和功能,修复分子损伤部位。硒有清除自由基、减少或延缓脂褐素产生的作用,有抗衰老和细胞死亡的作用,故有抗衰老的作用。(1)含硒GSH-px清除自由基。含硒的GSH-PX具有很强的抗氧化活性,可将过氧化物(ROOH或H2O2)还原为无毒的醇和水。没有含硒的GSH-PX,H2O2可以破坏吞噬细胞。另一方面,含硒的GSH-PX能催化H2O2的还原,使活性氧减少。这样就减少了不饱和脂肪酸和脂类被氧化的机会,产生自由基的机会也不会太多。(2)硒能分解脂质过氧化物,调节细胞转化中脂氧合酶途径和环氧化酶途径的平衡,避免产生过多的自由基。(3)自由基可以自行清除。
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