植物DNA提取中怎样检测提取到DNA质量 甲酰胺检测方法
网上有很多关于植物DNA提取中怎样检测提取到DNA质量的问题,也有很多人解答有关甲酰胺检测方法的知识,今天艾巴小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
内容导航:
一、azodicarbonamide(ADC)偶氮二甲酰胺的检测标准
三、如何测试甲酰胺(CAS# 75-12-7 )? 目前并无测试标准啊, 还有就是目前有它的标准品卖吗?
一、azodicarbonamide(ADC)偶氮二甲酰胺的检测标准
HG/T 2097-1991偶氮二甲酰胺(发泡剂ADC)用检测方法;
标准文本可以在网上或书店购买。
二、植物DNA提取中怎样检测提取到DNA质量
第一种方法是测量260/280的比值,确定蛋白质是否有污染。在260nm和280nm处测量DNA溶液的光吸收,A260和A280的比值应该在1.75和1.80之间。低于此值,说明制剂中残留蛋白质成分高或含有苯酚,高于此值,说明有残留RNA。
第二种方法是凝胶电泳分析,看有没有破损和降解。
影响DNA提取质量的因素;
如果植物样品在实验开始时没有用液氮处理,提取物中的CTAB浓度应该增加到4%。
在大多数情况下,使用0.1%巯基乙醇不能完全抑制叶片的氧化。但这种氧化不会影响限制性内切酶的活性。如果所用巯基乙醇的浓度高于0.1%,DNA提取的产率会大大降低。
扩展数据:
DNA提取方法:
一、酚提取法:先用卵酶K和SDS破碎细胞,消化蛋白,再用酚和酚氯提取,高速离心后取上清液,得到的DNA大小为100-150kb。
二、甲酰胺解聚法:细胞如上破碎,然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质和DNA的结合体,然后透析得到DNA,DNA约200 KB。
三、玻璃棒缠绕法:用盐酸胍裂解细胞,将裂解液铺在乙醇上,然后用钩子或U形玻璃棒在界面处轻轻搅拌,DNA沉淀缠绕在玻璃棒上。产生的DNA约为80kb。
四、异丙醇沉淀法:基本与方法1相同,仅用2倍体积的异丙醇代替乙醇,即可去除小分子RNA(溶于异丙醇)。
五、表面活性剂的快速制备方法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞,然后用蛋白酶K或苯酚去除蛋白,用乙醇沉淀或透析。
六、加热法快速制备:96-100加热五分钟,然后离心取上清液,可用于PCR反应。
七、碱变性快速制备:先用NaOH 20分钟,再加入HCl中和,离心后取上清液,含少量DNA。
三、如何测试甲酰胺(CAS# 75-12-7 )? 目前并无测试标准啊, 还有就是目前有它的标准品卖吗?
定性方法:
1.测定前后PH值发生变化,甲酸呈酸性,所以PH值会降低。
2.加入Na2CO3可以产生气泡吧?
3.酶比色法及酶联法技术(详见文献)
4.色谱法也可以试试(我自己没试过),说不定还可以和标准对比。
定量方法:
1.HPLC就可以了。注意溶剂的选择。
2.紫外线加一些显色剂应该没问题。可以查一下相关文献,应该有很多。
3.滴定
希望这有所帮助
以上就是关于植物DNA提取中怎样检测提取到DNA质量的知识,后面我们会继续为大家整理关于甲酰胺检测方法的知识,希望能够帮助到大家!
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