lb固体培养基制备需要加热吗? lb固体培养基配方
网上有很多关于lb固体培养基制备需要加热吗?的问题,也有很多人解答有关lb固体培养基配方的知识,今天艾巴小编为大家整理了关于这方面的知识,让我们一起来看下吧!
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一、lb固体培养基制备需要加热吗?
需要
在烧杯中,可以先加入比需要量少的水,用玻璃棒搅拌,然后在石棉网上加热使其溶解。药物完全溶解后,加水至所需的总体积。如果制备固体培养基,将称量的琼脂放入溶解的药物中,然后加热使其融化。在琼脂融化的过程中,需要不断搅拌,防止烧杯在琼脂糊底部破裂。最后,把失去的水补回来。
二、lb固体培养基配方是什么?
LB一般被解释为鲁利亚-贝尔塔尼培养基,它的发明者是伯塔尼(来自厄塔尼)。措顺人强初凝胶研究培养的名称来源于英文lysogeny broth,即溶菌肉汤。LB培养基配方如下:胰蛋白胨10g /L酵母膏5g/L氯360问答钠(NaCl) 10g丝面大足/L琼脂粉15g/L抗生素一定要在温度下降前加入,一定要倒平板。LB固体培养基是反向的。1.准备:在100毫升LB培养基中加入1.5克琼脂粉。2.添加抗过敏原:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置于55水浴中,待培养基温度降至55(可用手触摸)时加入抗生素,避免抗生素因温度过高而失效,并充分摇匀。3.翻转:一般10ml翻转一块板。培养基倒入培养皿后,先打开盖子,在紫外线下光照5分钟,10-1。4.保存:用封边胶封边,4下倒置保存,这样六排的黄金谁帮谁用,一个月之内就可以用了。
三、LB培养基如何配制?
以制备一升培养基为例:
应加入950毫升去离子水中:
胰蛋白胨10g
酵母提取物5g
摇动容器,直到溶质溶解。用5mol/LNaOH调节pH至7.0,用去离子水调节体积至1L。15磅/平方英寸的高压蒸汽灭菌21分钟。
扩展信息:
配置原则:
1、选择合适的营养物质就微生物的主要种类而言,有细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、原生动物、藻类和病毒,培养它们所需的培养基也不同。
实验室常用牛肉酱蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基)培养细菌,用高氏I合成培养基培养放线菌,一般用酵母培养麦芽汁培养基,一般用霉菌培养夏加尔合成培养基。
2、合适的营养浓度和配比培养基中的营养浓度合适,微生物才能生长良好,营养浓度过低,不能满足微生物的正常生长需要,浓度过高,则可能抑制微生物的生长。
此外,培养基中营养物的浓度比也直接影响微生物的生长繁殖和/或代谢产物的形成和积累,其中C/N比影响较大。严格来说,碳氮比是指培养基中碳氮的比例,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白的比例。
3、 pH控制条件
培养基的pH值必须控制在一定范围内,以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各种微生物生长繁殖或代谢产物产生的最适pH条件是不同的。一般来说,细菌和放线菌适合在pH7-7.5范围内生长,而酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。
值得注意的是,在微生物生长、繁殖和代谢过程中,由于营养物质的分解利用和代谢产物的形成积累,培养基的pH值会发生变化。如果不控制培养基的pH条件,微生物的生长速度往往会降低或(和)代谢产物的产量会降低。
4、控制氧化还原电位
不同类型的微生物对氧化还原电位(F)有不同的要求。一般好氧微生物在F值在0.1V以上就能正常生长,一般以0.3-0.4V为宜。厌氧微生物只能在0.1V以下生长,兼性厌氧微生物在F值0.1V以上进行有氧呼吸,0.1V以下发酵.
5、原材料来源的选择
在制备培养基时,应使用廉价易得的原料作为培养基组分
为了获得微生物的纯培养物,必须避免杂菌的污染,因此所用的设备和工作场所应进行消毒和灭菌。对于培养基,需要进行严格的灭菌。一般来说,培养基是用高压蒸汽灭菌的。一般培养基在121.3下1.05kg/cm2灭菌15-30分钟即可。
在配制培养基的过程中,泡沫的存在对灭菌极为不利,因为泡沫中的空气形成隔热层,使得泡沫中的微生物难以被杀死。因此,有时需要在培养基中添加消泡剂,以减少泡沫的产生或适当提高灭菌温度。
以上就是关于lb固体培养基制备需要加热吗?的知识,后面我们会继续为大家整理关于lb固体培养基配方的知识,希望能够帮助到大家!
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